Simmerwittenskipsgids: As in hjitteweach fan 40 °C molekulêre eksperiminten treft

Hege temperatueren hawwe koartlyn yn in grut part fan Sina oanhâlden. Op 24 july hat it Provinsjale Meteorologyske Observatoarium fan Shandong in giele warskôging foar hege temperatueren útjûn, wêrby't "sauna-eftige" temperatueren fan 35-37 °C (111-133 °F) en 80% fochtigens foar de kommende fjouwer dagen yn it binnenlân foarsein wurde. Temperatueren yn plakken lykas Turpan, Xinjiang, benaderje 48 °C (111-133 °F). Wuhan en Xiaogan, Hubei, hawwe in oranje warskôging, mei temperatueren boppe de 37 °C yn guon gebieten. Yn dizze gleone hjitte ûnderfynt de mikroskopyske wrâld ûnder it oerflak fan pipetten ungewoane steuringen - de stabiliteit fan nukleïnesoeren, de aktiviteit fan enzymen en de fysike steat fan reagentia wurde allegear stil ferfoarme troch de hjitteweach.

Nukleïnezuurwinning is in race tsjin 'e tiid wurden. As de bûtentemperatuer boppe de 40 °C komt, sels mei de airconditioning oan, leit de temperatuer fan 'e operaasjetafel faak boppe de 28 °C. Op dit stuit degradearje RNA-samples dy't yn 'e iepen loft litten wurde mear as twa kear sa hurd as yn 'e maitiid en hjerst. By magnetyske kralenwinning is de bufferoplossing lokaal verzadigd troch fersnelde ferdamping fan it oplosmiddel, en kristallen falle maklik del. Dizze kristallen sille grutte fluktuaasjes feroarsaakje yn 'e effisjinsje fan it fangen fan nukleïnezuur. De flechtigens fan organyske oplosmiddels nimt tagelyk ta. By 30 °C nimt de hoemannichte chloroformferdamping mei 40% ta yn ferliking mei 25 °C. Tidens operaasje is it needsaaklik om te soargjen dat de wynsnelheid yn 'e dampkap 0,5 m/s is, en nitrilhandschoenen te brûken om de beskermjende effektiviteit te behâlden.

PCR-eksperiminten hawwe te krijen mei noch kompleksere temperatuerfersteuringen. Reagentia lykas it Taq-enzym en reverse transkriptase binne ekstreem gefoelich foar hommelse temperatuerfluktuaasjes. Kondensaasje op 'e buiswanden nei it fuortheljen út in -20 °C friezer kin mear as 15% ferlies fan enzymaktiviteit feroarsaakje as it it reaksjesysteem yngiet. dNTP-oplossingen kinne ek detektearbere degradaasje sjen litte nei mar 5 minuten bleatstelling oan keamertemperatuer (> 30 °C). De wurking fan it ynstrumint wurdt ek beheind troch hege temperatueren. As de omjouwingstemperatuer fan it laboratoarium > 35 °C is en de waarmteôffierromte fan it PCR-ynstrumint net genôch is (< 50 sm fan 'e muorre), kin it ynterne temperatuerferskil wol 0,8 °C berikke. Dizze ôfwiking kin derfoar soargje dat de amplifikaasje-effisjinsje oan 'e râne fan in 96-putplaat mei mear as 40% sakket. Stoffilters moatte regelmjittich skjinmakke wurde (stofophoping ferminderet de waarmteôffier-effisjinsje mei 50%), en direkte airconditioning moat foarkommen wurde. Fierder, by it útfieren fan PCR-eksperiminten oernachts, foarkom it brûken fan it PCR-ynstrumint as in "ymprovisearre kuolkast" om samples op te slaan. Bewarje by 4 °C foar mear as 2 oeren kin kondensaasje feroarsaakje nei't it ferwaarme deksel sluten is, wêrtroch it reaksjesysteem ferdund wurdt en de metalen modules fan it ynstrumint mooglik korrodearje kinne.

Konfrontearre mei oanhâldende warskôgings foar hege temperatueren, moatte molekulêre laboratoaria ek alarm slaan. Kostbere RNA-samples moatte opslein wurde yn 'e efterkant fan in -80 °C friezer, mei tagong beheind ta perioaden mei hege temperatueren. It mear as fiif kear deis iepenjen fan 'e doar fan in -20 °C friezer sil temperatuerfluktuaasjes fergrutsje. Apparatuer dy't hege waarmte genereart, fereasket teminsten 50 sm waarmteôffierromte oan beide kanten en efterkanten. Fierder is it oan te rieden om de eksperimintele timing te herstrukturearjen: 7.00-10.00 oere foar temperatuergefoelige operaasjes lykas RNA-ekstraksje en laden fan qPCR; 13.00-16.00 oere foar net-eksperiminteel wurk lykas gegevensanalyse. Dizze strategy kin effektyf foarkomme dat hege temperatuerpieken krityske stappen bemuoie.

Molekulêre eksperiminten tidens in hjitteweach binne in test fan sawol technyk as geduld. Under de ûnmeilydsume simmersinne is it miskien tiid om jo pipette del te lizzen en in ekstra doaze iis ta te foegjen oan jo samples, sadat it ynstrumint mear waarmte kin ôffiere. Dizze earbied foar temperatuerfluktuaasjes is krekt de kostberste laboratoariumkwaliteit tidens de gleone simmermoannen - yn 'e 40 °C hjitte fan' e simmer hawwe sels molekulen ommers in soarchfâldich beskerme "keunstmjittige poalregio" nedich.